文件名称：EL-4荷瘤鼠单链噬菌体抗体库的构建 (2007年)
文件大小：208KB
文件格式：PDF
更新时间：2024-06-03 02:00:46
自然科学 论文
目的：构建一个EL-4荷瘤鼠的单链噬菌体抗体库，为筛选高特异性和高亲和力的单链抗体做准备。方法：于C57小鼠腋区接种EL-4细胞，待肿瘤长大后，从脾细胞中提取总RNA，RT-PCR技术扩增小鼠抗体重、轻链可变区基因（VH、VL），用Linker将VH和VL基因连成单链抗体可变区片段（scFv）。双酶切后（Not Ⅰ、SfiⅠ）与预备好的pCANTAB5E噬粒载体连接，转化入感受态TG1，构建EL-4荷瘤鼠的单链噬菌体抗体库。随机抽取转化后的20个克隆，用以检测外源DNA的转入情况。结果：PCR扩增出的VH