单环刺蜢硫醌氧化还原酶的表达、纯化和复性* (2010年)

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文件名称：单环刺蜢硫醌氧化还原酶的表达、纯化和复性* (2010年)
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更新时间：2021-05-08 22:55:47
自然科学 论文 硫化物是1种广泛分布的有毒物质。硫醌氧化还原酶（SQR）是硫化物代谢的关键酶。单环刺蜢是1种生活在潮间带下区及潮下带中的底栖生物。本研究为了获得具有活性的单环刺蜢SQR，将其基因的开放阅读框cDNA克隆到原核表达载体pET28a中，转化大肠杆菌BL21（DE3）进行重组蛋白的表达，后采用稀释复性的方法对重组蛋白进行复性。经IPTG诱导后该重组蛋白主要以包涵体形式存在。用8mol/L的尿素溶解包涵体后，通过镍离子金属螯合柱纯化获得重组蛋白。首次通过蛋白复性的方法获得具有活性的单环刺蜢SQR，确定最佳稀释复性