文件名称：红色荧光蛋白在毕赤酵母中的高效表达 (2005年)
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更新时间：2024-06-19 21:13:54
自然科学 论文
报道了红色荧光蛋白(DsRFP)在毕赤酵母中的高水平表达．利用PCR技术从YEpFLAG-1-DsRFP扩增出DsRFP编码序列，克隆到毕赤酵母胞内表达载体pPIC3.5K构建重组表达载体pPIC3.5K-DsRFP．电击转化进毕赤酵母，G418-RDB平板双重筛选后获得重组转化子，经MM/MD平板培养与PCR鉴定，重组子全部为HIS+MUT+广表型．重组菌株诱导表达48h后获得了高效表达，摇瓶中表达水平达到细胞内总蛋白的12％，表达量达到1.8g/L．经硫酸铵分级沉淀，DE-AE-5PW阴离子交换柱层析