重组人VEGF165蛋白在毕赤酵母中高效表达与多克隆抗体的制备 (2014年)

时间:2024-07-02 00:06:16
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文件名称:重组人VEGF165蛋白在毕赤酵母中高效表达与多克隆抗体的制备 (2014年)

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更新时间:2024-07-02 00:06:16

自然科学 论文

构建pPIC9K-VEGF165分泌型载体,线性化后电击转化至GS115(his4)中,经最小葡萄糖培养基(MD平板)筛选出阳性表达菌株并进行聚合酶链式反应(PCR)验证。菌株发酵上清液经Sephadex G-25, Heparin Sepharose FF和Sephacryl S-100层析介质分离纯化,目的蛋白纯度达到95%,相对分子质量约为24ku。结果表明:重组人VEGF165蛋白能诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖,提高HUVEC细胞的活性;重组人VEGF165蛋白免疫小鼠,制备多克隆抗体,


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