文件名称:人Endostatin基因的克隆及其在Hela细胞中的表达* (2007年)
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更新时间:2024-06-07 20:39:42
自然科学 论文
利用RT-PCR克隆人Endostatin基因,分别构建到双顺反子表达载体pIRES2-EGFP和融合表达载体pEGFP-C1中。两个重组表达载体利用脂质体介导转染真核细胞Hela,48h后可在荧光显微镜下观察到被转染细胞发出绿色荧光。传代10次后,绿色荧光仍持续表达,说明是稳定转染。以转染细胞的总DNA为模板PCR检测Endostatin基因已整合到细胞染色体上。利用兔抗人Endostatin抗体对已转染细胞进行免疫组化检测,显微镜下观察,转染的细胞显棕红色,表明Endostatin在转染细胞内稳定表达