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文件名称：人Endostatin基因的克隆及其在Hela细胞中的表达* (2007年)
文件大小：1.76MB
文件格式：PDF
更新时间：2021-05-19 02:53:02
自然科学 论文
利用RT-PCR克隆人Endostatin基因，分别构建到双顺反子表达载体pIRES2-EGFP和融合表达载体pEGFP-C1中。两个重组表达载体利用脂质体介导转染真核细胞Hela，48h后可在荧光显微镜下观察到被转染细胞发出绿色荧光。传代10次后，绿色荧光仍持续表达，说明是稳定转染。以转染细胞的总DNA为模板PCR检测Endostatin基因已整合到细胞染色体上。利用兔抗人Endostatin抗体对已转染细胞进行免疫组化检测，显微镜下观察，转染的细胞显棕红色，表明Endostatin在转染细胞内稳定表达