文件名称：毛囊特异表达载体pCDsR-UI的构建以及绒山羊胎儿成纤维细胞的体外转染和筛选* (2012年)
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更新时间：2024-07-03 01:08:50
自然科学 论文
构建IGF1基因的毛囊特异表达载体，可为今后通过体细胞核移植技术建立转基因克隆绒山羊准备核供体细胞．将绵羊IGF1 cDNA序列，连接到含有UHS启动子序列的克隆载体 p19TU的SalI、SphI位点，获得过渡质粒载体p19TUI；pCDsRed2和过渡质粒载体分别经酶切和连接构成表达载体pCDsR-UI．以组织块贴附法分离和培养绒山羊胎儿成纤维细胞，外源性表达载体以脂质体方法转染所培养的第2代成纤维细胞，DMEM／F12+10％FBS、37℃5％ CO2中培养，经添加G418筛选，获得了稳定表达红色荧