文件名称：SMART策略构建小黑杨茎形成层全长cDNA文库 (2010年)
文件大小：421KB
文件格式：PDF
更新时间：2024-06-04 03:24:47
自然科学 论文
为了研究小黑杨木材形成过程中的关键基因，以2年生小黑杨茎形成层组织为试验材料提取RNA，采用SMART（RNA转录过程中的5’末端转换机制）技术合成cDNA第一链，通过LD-PCR合成双链cDNA。利用SfiⅠ限制性酶酶切后将其连接到质粒载体pDNR-LIB上，采用电穿孔法将重组质粒转化到大肠杆菌感受态细胞DH5α中，构建全长cDNA文库。文库质量鉴定表明：原始文库滴度为2.18×10 6pfu/mL，扩增后的文库滴度为5.46×109pfu/L，重组率为96%。插入片段长度在0.5～2.0kb之间，平均