葱蝇非滞育蛹的全长cDNA文库构建 (2010年)

时间:2024-05-27 22:06:38
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文件名称:葱蝇非滞育蛹的全长cDNA文库构建 (2010年)

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更新时间:2024-05-27 22:06:38

自然科学 论文

葱蝇具有兼性滞育的特性且与果蝇近缘,是昆虫滞育分子机理和冬滞育和夏滞育专化基因比较研究的理想模 式种,本研究目的在于构建葱蝇非滞育蛹的全长cDNA文库,为进一步的滞育专化基因筛选、克隆和表达分析奠定基础。利用RNAiso试剂提取葱蝇非滞育蛹的总RNA,采用SMART技术合成全长cDNA,将限制性内切酶SfiI消化后的cDNA克隆到质粒载体pDNR-LIB,转化入大肠杆菌(DH10B),获得原始文库。经过涂平板测定表明,原始文库的库容量为2.3x10 7个单克隆;随机挑取15个单克隆,通过PCR快速鉴定,插


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