重组Hepcidin融合蛋白的金属螯合亲和层析纯化 (2005年)

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文件名称：重组Hepcidin融合蛋白的金属螯合亲和层析纯化 (2005年)
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更新时间：2021-05-13 12:29:29
工程技术 论文 在大肠杆菌中表达的重组Hepcidin融合蛋白以包涵体形式存在，其N端带有6个组氨酸。以Ni2+-IDA-Sepharose Fast Flow为层析介质，在变性条件下以不同的咪唑和pH值洗脱方式对Hepcidin融合蛋白的纯化效果进行了比较，确定了该融合蛋白的金属螯合层析纯化条件。以60mmol/L咪唑洗脱杂蛋白，然后将pH值降至4．0洗脱融合蛋白，纯化后的融合蛋白纯度大于95％，而且不含咪唑，有利于下一步Hepcidin的制备。金属螯合层析中融合蛋白收率不低于90％。Ni2+，IDA-Sepharos