文件名称:HIV-1蛋白酶在大肠杆菌中的表达 (2009年)
文件大小:324KB
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更新时间:2024-07-02 13:43:02
自然科学 论文
分泌融合表达HIV-1蛋白酶(Protease, PR),用于对HIV蛋白酶抑制剂的筛选。利用重叠延伸PCR方法,获得使用大肠杆茵偏爱密码子的编码HIV-1蛋白酶(PR)的基因,将目的基因重组至原核表达载体pET-SP-DsbA-T,得到“pET-SP-DsbA-PRsite-PR”分泌融合表达型载体,重组载体转化大肠杆菌BL21(DE3)。工程茵在LB培养基中添加终浓度为0.1mM的IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析周质蛋白。DNA测序结果证实合成的HIV-1 PR基因与设计的序列完全一致,在周质空