采用易错PCR对粘质沙雷氏菌几丁质酶C进行定向进化 (2010年)

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文件名称：采用易错PCR对粘质沙雷氏菌几丁质酶C进行定向进化 (2010年)
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更新时间：2021-06-18 03:36:04
自然科学 论文 以重组E。coliBL21(DE3)pLysS/pET22b桘ChiC为亲本,采用易错聚合酶链反应(PCR)技术,对粘质沙雷氏菌几丁质酶C基因(ChiC)进行定向进化研究畅经过两轮易错PCR后,建立突变体文库,进行平板初筛、包涵体复性及酶活检测复筛,获得一酶活较高的突变酶(Mut桘ChiC),其催化活性为亲本重组酶的1.9倍,比活力为出发菌酶活的3.3倍。对突变酶的酶学性质进行初步研究,其最适pH值为5.0,最适温度为60℃,而出发菌该酶的最适温度为40℃。进化酶基因经DNA测序并通过软件与亲本型酶基因进