文件名称:志贺氏菌实时荧光单引物等温扩增方法的建立及应用 (2015年)
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更新时间:2024-06-05 09:00:23
工程技术 论文
以志贺氏菌ipaH 基因特异序列为靶序列,设计RNA-DNA 组合引物和链终止序列,优化反应体系,建立实时荧光单引物等温扩增检测志贺氏菌的方法,反应时间为44 min。通过对4株不同群志贺氏菌和12株其他食源性致病菌进行实时荧光单引物等温扩增检测,结果表明,除4株志贺氏菌外,其他细菌均未扩增出荧光曲线。进一步研究表明,采用普通热裂解法提取DNA,实时荧光检测福氏志贺氏菌DNA的灵敏度为1. 16 fg/μL,纯培养菌液的灵敏度为1. 3 CFU/mL;对牛奶模拟样品中福氏志贺氏菌的检出限是1. 8 CFU