D乳酸高产菌菊糖芽胞乳杆菌Y28磷酸果糖激酶基因在大肠杆菌中的克隆和表达 (2014年)

时间:2024-06-02 02:00:53
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更新时间:2024-06-02 02:00:53

自然科学 论文

以D乳酸高产菌菊糖芽胞乳杆菌Y28基因组DNA为模板,通过PCR扩增得到960 bp的磷酸果糖激酶基因(pfk)。氨基酸序列比对分析表明,该磷酸果糖激酶(PFK)与其他乳酸菌PFK具有保守的底物结合位点,但是其变构效应物结合位点存在差异。将pfk基因克隆到表达载体pSE380上,获得重组菌EpSEpfk。进一步通过诱导条件的优化,重组菌的PFK比酶活达到4.89 U/mg,是优化前的4.79倍。采用低温诱导策略有助于实现菊糖芽胞乳杆菌pfk基因在大肠杆菌中可溶性表达。


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