重组刺桐胰蛋白酶抑制剂的制备及活性鉴定 (2005年)

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文件名称：重组刺桐胰蛋白酶抑制剂的制备及活性鉴定 (2005年)
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更新时间：2021-05-21 00:14:31
自然科学 论文 刺桐胰蛋白酶抑制剂（ETI）是一种Kunitz型胰蛋白酶抑制剂，能够抑制胰蛋白酶及组织型纤溶酶原激活剂的活性，因此ETI可以作为配体与固定相偶联用于亲和层析．利用化学合成及聚合酶链式反应（PCR）的方法获得ETI的编码基因，然后用Ndel／Sacl酶切并插入载体pET25b（＋）中构建重组表达质粒pET25b（＋）／ETI．重组表达质粒转化大肠杆菌BL21（DE3）后，用IPI、G诱导使重组ETI（rETI）过量表达形成包涵体．包涵体经过洗涤、复性及CM离子交换柱纯化，每升培养液可获得14mg rETI，