文件名称：分泌型水蛭素Ⅱ基因工程菌的构建 (2014年)
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更新时间：2024-06-01 17:44:05
自然科学 论文
水蛭素(Hirudin，HV)是目前已知的最强有力的凝血酶天然抑制剂，对多种血栓性疾病有很好的预防和治疗作用．构建两种融合DsbA信号肽的分泌型水蛭素Ⅱ基因工程菌，一种分泌的是N端第一个氨基酸突变为Ala的突变型水蛭素Ⅱ(spHV2mut)，而另一种分泌的是天然型水蛭素Ⅱ(spHV2)．采用重叠延伸(SOE)技术对水蛭素ⅡN端第一个氨基酸的基因序列进行定点突变，分别将突变和未突变的水蛭素Ⅱ基因重组至DsbA信号肽的编码基因下游，经限制性内切酶Nde Ⅰ和BamH Ⅰ酶切后，重组于表达载体pET-39b(+