文件名称：简化的人纤溶酶原饼环区5基因的克隆及其在大肠杆菌中的融合表达 (2006年)
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更新时间：2024-06-08 16:54:26
自然科学 论文
从正常人肝脏组织中提取总RNA，合理设计引物，利用RT-PCR直接得到简化的hPK-5基因。将该基因克隆至原核表达质粒pGEX-1λT，将此重组载体转化大肠杆菌JM109，经PCR、酶切及测序鉴定阳性克隆。用IPTG诱导阳性克隆表达融和蛋白，SDS-PAGE观察表达产物。再通过Westem-B1otting鉴定。简化的hPK-5基因的RT-PCR产物为264bp。通过酶切、测序等方法鉴定简化的hPK-5基因正确克隆至原核表达质粒pGEX-1λT中。重组质粒pGEX-1λT/predhPK-5在大肠杆菌中成