文件名称：罗氏沼虾原肌球蛋白基因的克隆表达及变应原性鉴定 (2012年)
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更新时间：2024-07-04 08:54:52
自然科学 论文
通过 NCBI查找到罗氏沼虾原肌球蛋白的 mRNA,根据其CDS区域设计特异引物,通过反转录聚合酶 链反应(RT-PCR)克隆出目的基因片段,测序后将该片段克隆到原核表达载体 pET-28a上,转化到 E. coli BL21(DE3)和 E. coli Rosatta后,经异丙基-B-D-硫代乳糖苷(IPTG)诱导表达,用Ni2+亲和层析柱对重组变应原 进行纯化. 采用免疫印迹检测其与对虾过敏患者血清的 IgE结合活性. 对罗氏沼虾变应原进行了表达、鉴定 及纯化,成功地获得了具有变应原活性的重组罗氏沼虾