沙棘木蠹蛾AFLP引物筛选及反应体系的建立 (2008年)

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文件名称:沙棘木蠹蛾AFLP引物筛选及反应体系的建立 (2008年)

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更新时间:2024-05-29 00:32:31

自然科学 论文

该文以沙棘木蠹蛾幼虫为材料,用改进的SDS-蛋白酶K法获得了高质量的符合AFLP分析要求的基因组DNA。通过对AFLP试验过程中的酶切-连接、预扩增、选择性扩增等各关键因素的比较研究,建立了一套优化的沙棘木蠹蛾AFLP分子标记体系,获得了清晰的指纹图谱。研究结果表明:利用EcoRⅠ/MseⅠ双酶切系统以酶切-连接2~4h,预扩增产物稀释20倍、Mg2+浓度为1.5mol/mL的选择性扩增效果最好。进一步利用该反应体系从80对E+3/M+3选择性引物中筛选出10对多态性丰富、分辨率高、谱带清晰的引物组合。该


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