文件名称:镍离子亲和层析介质的制备及其用于组氨酸标记蛋白质的纯化 (2010年)
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更新时间:2024-05-28 20:02:26
自然科学 论文
以交联琼脂糖微球为基质,通过环氧氯丙烷活化,偶联亚胺二乙酸并螯合Ni2+,制备得到一种镍离子亲和层析介质。结果发现,在强碱条件下环氧活化率达到了38.0 umoL/mL,最终Ni2+配基密度达到了30.9 umoL/mL,偶联效率为81.3%。利用得到的镍离子亲和介质对基因工程大肠杆菌表达的组氨酸标记3-羟基丁酮还原酶进行了一步层析纯化,酶活回收率达到了58.8%,纯化倍数为2.1,蛋白纯度在85%左右,纯化效果与常用商品介质基本相当。