文件名称：转 -甘露聚糖酶基因大肠杆菌 在猪肠道内的外泌型表达 (2006年)
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更新时间：2024-06-09 12:14:21
自然科学 论文
从里氏木霉 Rut C-30提取总 RNA,用 RT-PCR方法克隆到 -甘露聚糖酶成熟肽cD- NA,并将其EcoR和BamH I酶切后连接到克隆载体pGEM进行测序,结果与GenBank公布 的完全一致,随后将含有 -甘露聚糖酶基因的重组质粒pGEM-Man经 EcoR、绿豆芽核酸 酶、H indⅢ酶切处理和纯化后,与含有 序列和T7启动子以及信号肽OmpT序列的分泌型 表达载体pTOO2连接,构建成表达载体pTOO2-Man .然后利用大肠杆菌素释放基因(kil)能 有效的增加细菌外膜通透性促进周质