文件名称：辣椒素生物合成途径基因pal克隆及原核表达分析 (2010年)
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更新时间：2024-06-05 16:33:21
自然科学 论文
以辣椒品种益都红胎座RNA反转录的cDNA为模板,根据pal基因保守序列设计引物PCR扩增得到1条全长2157by的目的片段。该基因包含有完整的开放阅读框架,编码718个氛基酸,预测的分子质量为73ku。与多种植物PAL氛基酸序列有一定的同源性,其中与同科同属植物朝天椒的同源性最高。应用分子克隆的方法成功地构建了pET-32a-pal重组表达质粒,优化得到诱导表达的最佳条件为：IPTG0.3mmol-L-1,温度28℃,时间6h,y=SDS-PAGE检测6xHis-PAL在E.coli中得到了高效表达,重