文件名称：大鼠Fcε 3-4基因克隆及原核表达 (2012年)
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更新时间：2024-06-10 16:53:30
自然科学 论文
为了获得重组Fcε3-4蛋白，从变态反应性哮喘大鼠脾组织中提取总RNA，通过RT-PCR方法克隆大鼠Fcε3-4基因，构建成原核表达载体pET17b-Fcε3-4，并转化大肠杆菌进行诱导表达，Fcε3-4蛋白主要以包涵体形式存在．经Ni-NAT亲和层析柱对尿素溶解的Fcε3-4蛋白进行了纯化，并利用降低尿素梯度的方法柱上对纯化蛋白进行了复性．经Western Blotting和ELISA鉴定，Fcε3-4蛋白具有Fcε的免疫特异性，能被抗大鼠Fcε抗体特异性识别，为下一步研究该蛋白奠定了基础．