易错PCR技术提高中性内切葡聚糖酶活性 (2013年)

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文件名称：易错PCR技术提高中性内切葡聚糖酶活性 (2013年)
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更新时间：2021-05-08 12:17:45
工程技术 论文 近年来随着纤维素酶在食品加工工业中具有广阔应用前景，而纤维素酶的工业应用一直受酶活性低，成本高的限制。为了提高中性内切葡聚糖酶的活性，作者利用易错PCR技术对来自枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)C-36的内切葡聚糖酶基因进行定向进化研究，构建了在大肠杆菌中的突变体库。通过刚果红平板筛选，获得了酶活性提高的突变株F-10，活力比亲本酶提高4．2倍。序列分析表明：F-10有5个碱基发生突变，两个氨基酸突变：D212V和T307S。SDS- PAGE条带，表明基因表达正确，而表达量较原始菌株显