文件名称:金黄色葡萄球菌Coa基因的克隆、表达及生物活性检测 (2011年)
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更新时间:2024-06-04 16:37:10
自然科学 论文
【目的】克隆金黄色葡萄球菌血浆凝固酶(Coa)基因,并在大肠杆菌中进行融合表达,分析重组蛋白的生物活性。【方法】用PCR法扩增金黄色葡萄球菌Coa基因,构建Coa基因原核表达载体pET32a( + )/coa ,在大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达,采用SDS- PAGE法分析重组蛋白的表达水平;将重组蛋白纯化后,测定其血浆凝固效价。【结果】扩增出了2106 bp的Coa基因,其包含1个完整的开放阅读框,编码含701个氨基酸的成熟多肽;IPTG诱导后该基因表达的融合蛋白分子质量为100 ku ,目的