用差减cDNA文库筛选由热激导致的小鼠睾丸中差异表达的基因 (2009年)

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文件名称：用差减cDNA文库筛选由热激导致的小鼠睾丸中差异表达的基因 (2009年)
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更新时间：2021-05-15 19:22:54
自然科学 论文 采用抑制性差减杂交(Suppression Subtractive Hybridization，SSH)方法，构建正常和热激小鼠睾丸组织的差减 cDNA文库，以期筛选出小鼠生精过程中对热敏感的基因。分别从正常和热激小鼠睾丸组织提取总RNA，反转录成cDNA，以正常小鼠睾丸组织cDNA作为待检组织(tester)，以热激小鼠睾丸组织cDNA作为驱动组织(driver)，经过2轮杂交和抑制性PCR扩增，产物与T载体连接，经蓝白斑筛选，提取质粒，经EcoRI酶切鉴定插入片段并测序，由此构建了2种组织间差异表达基