文件名称:用差减cDNA文库筛选由热激导致的小鼠睾丸中差异表达的基因 (2009年)
文件大小:551KB
文件格式:PDF
更新时间:2024-06-04 13:09:34
自然科学 论文
采用抑制性差减杂交(Suppression Subtractive Hybridization,SSH)方法,构建正常和热激小鼠睾丸组织的差减 cDNA文库,以期筛选出小鼠生精过程中对热敏感的基因。分别从正常和热激小鼠睾丸组织提取总RNA,反转录成cDNA,以正常小鼠睾丸组织cDNA作为待检组织(tester),以热激小鼠睾丸组织cDNA作为驱动组织(driver),经过2轮杂交和抑制性PCR扩增,产物与T载体连接,经蓝白斑筛选,提取质粒,经EcoRI酶切鉴定插入片段并测序,由此构建了2种组织间差异表达基