文件名称:耐热、高产重组人Cu, Zn-SOD改构体的构建及纯化方法的研究 (2010年)
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更新时间:2024-06-09 04:01:08
自然科学 论文
目的 通过对天然人Cu,Zn-SOD基因的改造,得到热稳定性、活性产量提高的重组人Cu,Zn-SOD(rhCu,Zn-SOD)改构体,并进行蛋白纯化方法的研究。方法 重叠PCR技术将天然hCu,Zn-SOD的Cys6突变为Ala6,Cys111突变为Ser111,构建重组质粒pET22b-rmbCu,Zn-SOD6Ala,111Ser,转化大肠杆茵BL21(DE3),IPTG诱导后SDS-PAGE分析改构体蛋白的表达,并进行Westem bolt鉴定;研究改构体蛋白的纯化方法,HPLC检测蛋白纯度,比