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文件名称：细胞穿膜肽TAT与小鼠干细胞转录因子Oct4融合表达及纯化 (2013年)
文件大小：322KB
文件格式：PDF
更新时间：2021-05-15 01:51:39
工程技术 论文
将TAT-Oct4目的基因插入pET28a表达载体，构建重组表达质粒pET28a-TAT-Oct4，形成大肠杆菌重组表达体系。融合蛋白TAT-Oct4在大肠杆菌中主要以包涵体形式表达，表达产物经纯化后，纯度可达90％以上。通过尿素梯度透析复性，TAT-Oct4平均复性收率为8．8％。细胞免疫荧光技术分析表明，TAT-Oct4融合蛋白可穿透近l00％细胞的细胞膜，其进膜后主要分布于细胞核内。建立了具有活性的TAT-Oct4融合蛋白生物制备方法，为细胞重编程提供了一种有效的研究材料，并可为其他用于细胞重编程的