文件名称：LAMP技术快速检测海产品副溶血弧菌的条件优化 (2015年)
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更新时间：2024-06-19 11:15:48
工程技术 论文
本研究以副溶血弧菌不耐热溶血素tlh为目标基因设计特异性引物，优化反应条件，并对特异性、灵敏度进行了验证。LAMP最佳反应条件为，外内引物浓度比为l：8，Mg2+反应浓度为4 mmol/L，dNTPs浓度为3.5 mmol/L，温度为 65 ℃，反应时长为1 h，只对副溶血弧菌产生扩增反应，与其余细菌不产生扩增反应，细菌基因组DNA和纯培养物的灵敏度约为5.45×101 fg/μL和140 cfu/mL，对人工污染食品样品进行检测，检出限为2.8×102 cfu/mL。该方法反应时间短、特异性强、灵敏度高