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文件名称：可抑制I型胶原表达的siRNA重组腺病毒的构建 (2013年)
文件大小：4.27MB
文件格式：PDF
更新时间：2021-06-01 01:49:18
自然科学 论文
滑膜间质干细胞(SMSCs)与其他来源的间质干细胞相比,具有更强的生长能力和更大的软骨分化潜力。但由于SMSCs固有地表达I型胶原,这将会大大损害再生软骨的整体质量。为解决此问题,文中首先设计了可抑制I型胶原表达的shRNA,并将其构建到腺病毒载体上。接着通过PacI酶切反应,使重组腺病毒载体线性化并通过脂质体转染293细胞进行病毒包装。收集的病毒初液进行滴度测定后,再次通过293细胞进行病毒扩增,经过纯化后,最终获得高滴度重组腺病毒。将重组腺病毒分别感染成纤维细胞和成骨细胞,通过荧光显微镜观察,检测转染