文件名称：鱼腥藻铁调蛋白基因(alr0957)表达和Fe3+对藻生长的影响 (2014年)
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更新时间：2024-06-07 01:26:17
自然科学 论文
根据CyanoBase提供的鱼腥藻PCC7120FurC基因(alr0957)序列信息设计特异性引物,用降落PCR法从染色体DNA中扩增得约450bp目的片段。运用TA克隆将其连接到pMD18-T载体上,经筛选测序获得阳性重组质粒。再经过双酶切、纯化FurC基因,连接原核表达载体pET-28a(+),并转化表达菌株BL21和IPTG诱导表达。经测序鉴定的阳性菌株中的FurC,运用SDS-PAGE检测重组蛋白,并利用镍柱层析法纯化目的蛋白。由藻细胞密度、叶绿素a含量、可溶性糖含量等改变探讨不同Fe3+浓度对