文件名称:H5N1亚型禽流感病毒NS1基因的克隆及原核表达 (2011年)
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更新时间:2024-06-18 12:42:55
自然科学 论文
克垄表达和纯化禽流感病毒H5N1 NS1基因序列,为筛选与NS1相互作用的宿主蛋白以及深入研究NS1蛋白的功能打下基础。根据GenBank中收录的H5N1亚型禽流感病毒NS1基因序列,设计并合成一对特异性引物,利用RT-PCR方法扩增AIV NS1基因,将酶切处理后的基因片段定向克隆到原核表达载体pET-28a载体上,经酶切分析及序列测定正确后,鉴定出NS1基因的阳性重组子。阳性质粒转化大肠杆菌BL21( DE3)感受态细胞,用1mmol/L IPTG诱导表达,表达产物进行SDS-PAGE检测,获得预期蛋