文件名称：铁皮石斛野生居群研究(Ⅳ): RAPD反应体系的构建与优化 (2006年)
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更新时间：2024-05-28 12:46:13
自然科学 论文
为获得铁皮石斛RAPD的最佳反应体系，本文对影响RAPD反应的模板含量、Mg2+浓度、dNTP浓度、Taq酶浓度、扩增程序及退火温度等多种因子进行了构建与优化。通过各因子的组合研究，我们得到铁皮石斛RAPD反应最适扩增体系是：25μLPCR反应体积，10×Buffer 2.5 μL，2.5 mmol/L MgCl2，dNTP 2.5 pxL（各2.5mmol/L），模板DNA为30ng，Taq聚合酶1.5U，随机引物12pmol，ddH2O14.2μL最佳扩增程序：94℃预变性3min，94℃变性50s，