RT-PCR检测菊花B病毒的研究 (2002年)

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文件名称：RT-PCR检测菊花B病毒的研究 (2002年)
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更新时间：2021-05-17 05:30:38
自然科学 论文 根据菊花B病毒(CVB)的外壳蛋白基因序列设计、合成引物,以感病组织和健康组织总RNA为模板,进行cDNA合成和PCR扩增,结果从感病组织中扩增出与预期的776bp大小一致的目标片段,而健康组织无此扩增产物;将PCR产物插入pGEM -T载体克隆并测序,序列分析表明与CVB的相应序列同源性达到85 % ;将感病组织总RNA以10x梯度稀释成不同浓度,测出RT -PCR检测CVB的灵敏度为10 -4x ;PCR产物克隆作为RT -PCR反应的阳性对照,解决了毒源保存和传播的问题,从而建立了CVB快速、灵敏、