文件名称：设计和鉴定花生主要过敏原Arah2低致敏原衍生物 (2011年)
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更新时间：2024-06-11 18:02:03
自然科学 论文
构建序列重新组合的Arah2表达载体，表达并纯化该蛋白，鉴定其低致敏原性。将Arah2基因进行合理的缺失和重排，并将重排后的基因T-Arah2克隆到原核表达载体pET-32a(+)上，然后转入Origami宿主表达菌中；再用IPTG诱导其表达；通过Ni2+亲和层析(FPLC)纯化目的蛋白；Western-blotting和ELISA鉴定该重组蛋白的低致敏原性。测序结果表明重排后的序列成功克隆到原核表达载体pET-32a(+)上。重组蛋白纯化后经SDS-PAGE鉴定，目的蛋白大小与理论值相符。Westcrn