文件名称：HIV-1 Tat-TAR结合抑制剂筛选模型的构建 (2011年)
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更新时间：2024-06-03 00:02:58
工程技术 论文
将HIV-1 Tat(1-86aa)编码序列插入原核表达质粒pET28a中,转化E.coli BL21 (DE3),IPTG诱导Tat蛋白表达,并用Ni +金属螯合层析介质纯化;把TAR DNA序列插入到含有T7启动子的载体pBluescript II SK( +)中,用T7 RNA多聚酶体外转录合成TAR RNA。用毛细管电泳观察Tat与TAR的结合活性,并用转录抑制活性化合物AP064检验对Tat-TAR结合的阻断作用。结果显示,制备的Tat和TAR能相互结合,并被AP064有效阻断,表明此模型可用于