文件名称：采用同源重组技术构建金黄色葡萄球菌sae基因缺失突变株 (2012年)
文件大小：304KB
文件格式：PDF
更新时间：2024-06-05 15:54:52
工程技术 论文
针对金黄色葡萄球菌sae基因前后两段序列设计两对引物，PCR扩增出sae基因上下游同源臂序列，克隆到穿梭载体pBT2中；两段序列之间用来自质粒p646的Em抗性基因片段连接，作为筛选标记，从而构建同源重组穿梭质粒pBT2△sae；将pBT2△sae电转化到金黄色葡萄球菌菌株RN4220中，40℃经过七轮培养，进行抗性培养基筛选和PCR验证，以及RT-PCR观察基因表达水平。获得一株金黄色葡萄球菌sae基N缺失突变株RN△sae，为进一步研究sae基因的调控机制等提供有用的实验材料。