文件名称:柽柳类锌指基因ThZFL酵母诱饵表达载体的构建及其表达验证 (2011年)
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更新时间:2024-05-30 12:42:49
自然科学 论文
利用PCR技术从柽柳cDNA文库中克隆出ThZFL目的基因序列,连接到pMD18-T载体,转化大肠杆菌DH5仪感受态,经检验后提取质粒,用BamHI和眈oRI限制性内切酶双酶切pMD18-T―ThZFL载体和pG-BKT7-BD空载体,并将酶切产物胶回收后,用T4DNA连接酶连接过夜后转化大肠杆菌DH5d感受态获得目的基因转化子pGBKT7-ThZFL,对转化子进行质粒PCR检验、质粒酶切检验、DNA测序鉴定。将测序检验正确的pG-BKT-/-ThZFL转化子,转化酵母Y2Hgold菌株,对转化后的酵母涂