文件名称：大黄鱼(Larimichthys crocea)fAFLP方法的建立 (2013年)
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更新时间：2024-07-05 07:25:50
自然科学 论文
以大黄鱼为材料，探索及优化了影响荧光标记AFLP(fAFLP)分析体系的主要因素．结果表明：内切酶EcoR Ⅰ与Mse Ⅰ各0．35 U，双酶切350 ng大黄鱼基因组DNA，依次反应4 h可得最佳效果；T4 DNA连接酶2．5 U，16℃过夜连接3 μL酶切产物与接头时效果最佳；以1μL连接产物作底物，EcoR Ⅰ与 Mse Ⅰ预扩引物分别为0．3 μmol／L与1．5μmol／L时预扩效果最佳；预扩产物稀释超过100倍作为选择性扩增的模板时致使某些样品的电泳条带缺失．使用该体系分析了一个野生大黄鱼群体