文件名称：通用型奶牛多位点基因打靶载体系统的构建 (2006年)
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更新时间：2024-05-26 18:40:36
自然科学 论文
以奶牛为研究对象，以其重复的rRNA基因间的间隔序列为靶位点，基于BAC重组酶系统构建多位点基因打靶载体，为建立体内多位点基因打靶技术获得关键材料．首先构建BAC-TDN筛选载体，然后构建pYLVS-GD表达载体．将BAC-TDN筛选载体和pYLVS-GD表达载体共转化至大肠杆菌NS3529中，通过Cre重组酶的作用形成BAC-TDN-VS-GD质粒，采用归位内切酶，ISce Ⅰ切除pYLVS载体骨架，构建奶牛多位点基因打靶载体BAC-TDN-GD，利用接头LS使之环化．BAC-TDN-GD打靶载体与pY